動物源性檢測試劑的操作方法介紹

　　動物源性檢測試劑適用于粗品動物源性原料的摻假檢測，運用配套的磁珠法試劑盒提取DNA，已提取的DNA為模板進行實時熒光PCR擴增，以實時定量檢測技術，采用單重PCR方法將所用試劑配置成預混合形式組建成實時熒光PCR（豬源和反芻源）DNA檢測試劑盒，其中一管是檢測樣本中豬基因的含量（FAM熒光） 另一管是檢測樣本中反芻源動物的基因的含量。

　　用戶只需每孔加5ul的DNA樣品即可上機測試，大大提高了使用的便捷，同時減少了交叉污染的機率，避免整個試劑盒反復凍融，從而影響檢測效果。

　　動物源性檢測試劑如何去操作呢？

　　1、需要按試劑準備中描述的方法，配制好動物源性DNA檢測試劑盒各種組分的工作液。

　　2、所有試劑和組分都先恢復到室溫，標準品、質控品和樣品，建議做復孔。

　　3、從鋁箔袋中取出所需板條，剩余的板條用自封袋密封放回冰箱。

　　4、設置標準品孔、樣本孔和空白孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL，樣本孔加待測樣本50μL，空白孔不加。

　　5、用封板膜蓋住反應板，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60分鐘。

　　6、除空白孔外，標準品孔和樣本孔，加入過氧化物酶標記的檢測抗體100μL。

　　7、揭開封板膜，棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置20s，甩去洗滌液，吸水紙上拍干。

　　8、將底物A和B按1：1體積充分混合，所有孔中加入底物混合液100μL，用封板膜蓋住反應板，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育15分鐘。

　　9、如此重復4次，若使用自動洗板機，請按洗板機操作程序進行洗板，添加浸泡20秒的程序，可以提高檢測的精度；洗板結束，加底物前，要在干凈不掉屑的紙上，充分拍干反應板。